成果简介
猪流行性腹泻病毒（Porcine epidemic diarrhea virus, PEDV）引起的PED是猪的一种接触性肠道传染病，该病的临床表现为呕吐、腹泻及脱水，具有发病急、传播快、病死率高的特点。该病主要对1周龄以下的仔猪造成致命性危害，其感染后发病率和病死率高达80%~100%。分泌型免疫球蛋白A（Secretory immunoglobulin A, SIgA）在病毒入侵机体时黏膜表面起重要的防御作用，监测乳汁中SIgA的抗体水平对于PED的控制及预防具有重大意义。基于目前PEDV疫苗在养猪业中大规模的使用，建立检测母猪初乳中抗PEDV特异性SIgA的方法可以用于疫苗免疫效果的评价，为PEDV免疫程序的优化提供理论依据。
本成果公开了一种母猪初乳中PEDV特异性SIgA抗体的ELISA检测方法,该法运用基因克隆、原核表达、多克隆抗体制备等技术,先从母猪初乳中克隆得到SIgA特有的成分SC片段,并构建原核表达载体对该片段进行表达,然后用PEDV病毒对制备的兔抗猪SC多克隆抗体进行包被,封闭后依次加入一抗、二抗和三抗各孵育1h,最后加终止液测OD-(450nm)值。
应用前景
本成果拥有以下优势：
本发明具有经济、便捷、快速、准确的特点,为进一步探索母猪乳汁中PEDV特异性SIgA抗体的动态变化规律、PEDV黏膜免疫效果的评估以及免疫程序的优化提供了可靠的方法,也为预防PEDV对哺乳仔猪的感染提供科学依据。
成熟度
本成果在实验室和临床小试阶段取得初步成功。
知识产权情况
成果完成人
动物科学技术学院：欧阳康
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